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流动相的配制
更新时间:2017-08-17   点击次数:2435次

  含有缓冲成分的移动相基本上可以通过两种途径来配制:

  在与有机相组分混合前完成包括pH调节步骤在内的所有缓冲溶液配置过程。

  在缓冲溶液和有机相组分混合之后调节总溶液pH值。

  在水溶液体系中pH是一个很好确定的参数,但是在含有部分有机相的溶剂中pH值就没那么好确定了,或者说质子浓度就不容易测准了。

 

  因此建议在配制缓冲水溶液时,就调好pH值,用规格为0.4微米的滤膜过滤后再同有机相组分混合。需要注意以下几点:

pKa值两侧+/-1范围内是zui有效的缓冲区域,以此为参考选择正确的缓冲系统。

如果需要将高浓度缓冲液同有机相组分混合,请考虑缓冲溶质沉淀析出的可能性。

在使用前总是选用规格为4微米的滤膜对缓冲液进行过滤。

注意纯水相缓冲液中细菌和真菌滋生的可能性。

在加入有机相组分时,整体溶液pH值通常会产生一些漂移,无机缓冲体系(例如磷酸盐)的pH值会有所上升,而有机缓冲体系(例如乙酸)pH值则会有所下降。

 

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